方法一：1.根據(jù)樣品重量（1g樣品加入3.5ml提取液，可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入），準(zhǔn)備提取液放在冰上。2.樣品放在研缽中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上靜置（3-4小時(shí)）。3.用離心機(jī)離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4.提取上清夜，樣品制備完成。5.蛋白質(zhì)提取液：300ml1Mtris-HCl（PH8）45ml甘油（Glycerol）75ml聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g這種方法針對(duì)SDS-PAGE，垂...

一、LNA的介紹鎖核酸（Lockednucleicacid，LNA）是一種經(jīng)過修飾的RNA，LNA中一部分核糖上的2'與4'碳連結(jié)在一起。一般可見于A-DNA或RNA。這類核酸可以增加引物或探針（probe）的融解溫度（Tm值），加強(qiáng)這些實(shí)驗(yàn)用物質(zhì)的穩(wěn)定性，可應(yīng)用在即時(shí)聚合酶連鎖反應(yīng)（real-timePCR）等技術(shù)中。近期,鎖核酸(lockednucleicacid,LNA)作為一種新穎的核苷酸衍生物在藥學(xué)研究領(lǐng)域引起了人們的廣泛關(guān)注,有希望成為分子水平治療各種疾病的新突破...

?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因主要包括細(xì)胞分裂時(shí)不均勻分配、受體細(xì)胞的遺傳影響、外源基因過度表達(dá)、以及環(huán)境因素。?一、?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因一?細(xì)胞分裂時(shí)不均勻分配?：在細(xì)胞分裂過程中，重組質(zhì)?？赡懿痪鶆虻胤峙涞阶哟?xì)胞中，導(dǎo)致一些子代細(xì)胞不含有重組質(zhì)粒，從而發(fā)生逃逸。這種逃逸與質(zhì)粒的拷貝數(shù)有關(guān)，低拷貝數(shù)質(zhì)粒在分裂時(shí)更有可能導(dǎo)致子代細(xì)胞不含重組質(zhì)粒?。二、?重組質(zhì)粒發(fā)生逃逸的原因二?受體細(xì)胞的遺傳影響?：受體細(xì)胞的核酸酶可能將重組質(zhì)粒視為外來DNA并進(jìn)行降解，阻礙其獨(dú)立復(fù)制。此外...

一、重組蛋白重組蛋白（recombinantprotein）是指應(yīng)用重組DNA或重組RNA技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應(yīng)用基因克隆或化學(xué)合成技術(shù)獲得目的基因（geneofinterest，GOI），連接到適合的表達(dá)載體，導(dǎo)入到特定的宿主細(xì)胞，利用宿主細(xì)胞的遺傳系統(tǒng)，表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì)分子。重組蛋白的正確溶解步驟包括離心、溶解和（可能的話）進(jìn)一步處理。二、重組蛋白溶解步驟一開蓋前離心試劑管。凍干粉在運(yùn)輸過程中可能會(huì)因顛簸而漂散并粘貼于管壁或管蓋上，所以在打開塑料瓶蓋前，...

一、前言蛋白質(zhì)印跡法（WesternBlot）通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。WesternBlotting實(shí)驗(yàn)單層貼壁細(xì)胞總蛋白的提取步驟：二、操作步驟1.倒掉培養(yǎng)液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液（或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫?huì)兒使殘余培養(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。2.每瓶細(xì)胞加3ml4℃預(yù)冷的PBS（0.01MpH=7.2～7.3）。平放輕輕搖動(dòng)1...